作者:医院实验诊断科谢依李亚周

微生物菌种鉴定室依然忙碌,这时血培养仪器发出报警信号,有血培养阳性瓶需要拿取,我按照惯例拿出阳瓶记录了报阳时间等信息,抽取其中血液涂片染色后给老师镜检,但老师镜检却未发现任何细菌,随机让我再涂片并进行瑞士染色和革兰染色,但仍然未发现任何细菌,这种情况让我困惑并有了思考,为何仪器已经报告阳性的血液标本里,却没有任何细菌生长喃,随即我和老师就这一情况寻找答案,把这个血液标本转种了血平板,麦康凯平板以及小巧克力平板,也未有细菌生长的现象,可以确定这个标本就是一个假阳性标本,再加上查阅各种资料,并联系临床医生讨论该患者情况,进行如下的总结。

血培养的概念与原理

1、血培养,是把静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶或培养管中,用来发现、识别细菌或其它可培养分离的微生物(如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等),这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。

2、比色计传感器和反射光原理,监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度(PH)改变,从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料颜色变浅,通过照射感应器连续采集信号后形成反应曲线进行分析,采用初始阈值法、斜率法及加速度法三种运算法则及时得到阳性信号。

如何判断血培养假阳性及应对方案

1、查看仪器是否有报警,查看瓶底颜色变化:排查仪器状态、操作失误和温度变化等引起的原因。

2、查看生长曲线:通过不同的生长曲线图形排查操作、标本、环境等因素的原因。

3、进行血培养直接涂片革兰染色,未查见细菌,则转入相应的平板,若平板也是阴性,建议将报阳血培养抽出10ml打入新的血培养瓶重新进行培养,若5天后仍然是阴性,则基本是假阳性。

血培养假阳性的因素

1、采血量过多或过少:血液细胞本身也能代谢产生CO2,无菌血液在血培养瓶培养时也会产生本地曲线的变化,当采血量过多的时候可能会造成假阳性,因而建议控制采血量。

2、培养环境的波动:实验室环境温度剧烈变化造成血培养的生长曲线波动而导致的假阳性,建议维持实验室的温度相对恒定,室温保持在15~25℃之间。仪器避免阳光直射或空调吹风口。仪器连接的电压不稳定或同一电源下连接其他大功率的设备,并且有频繁使用,引发电压波动。会导致生长曲线因电压而波动。建议如果电压不稳可以考虑配置稳压电源,不要将血培养仪和大功率的电器设备例如灭菌锅,离心机等位于同一线路上。

3、一些特殊病人的血细胞数量增多,或者成分异常增多,例如白细胞异常增多,原发性的血小板增多等引起新陈代谢加剧,释放大量的二氧化碳,就会出现假阳性的报警。

总结

查阅该患者病史,发现其白细胞确有增高现象,而很大一部分白血病患者,由于其免疫力下降或者进行化疗治疗后骨髓细胞骤减,较易感染菌血症,其血液培养阳性率较高。

而某些病人并不一定细菌感染,只是由于白细胞富集,或者任何能使二氧化碳增加,培养瓶ph改变,不是由于细菌代谢而又可以达到仪器报警范围的情况,都可以造成假阳,应及时与临床联系并沟通患者情况,而医生在送检血培养标本时,也可以视情况标明该患者是否存在白细胞增高或者其他血液成分极度变化的情况,而作为检验人员,在发现假阳瓶时,可以及时观察其瓶身底部是否变黄变浅,观察仪器上的生长曲线,出现假阳瓶时,如图所示的曲线较为平缓,可能由于其他如上诉列举的原因造成,而由于细菌生长代谢而检测到的曲线应为有明显陡然上升的特点。

临床工作需要细心认真负责,应善于发现问题,勤于思考并及时找出原因,善于总结,不放过任何可能性和任何一个关键环节,对待标本和病人需认真负责,及时有效地与临床沟通。

编辑:Rose审校:柒柒

                

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